内酰胺酶检测的实验原理：

　　酸测量法:青霉素被β-内酶胺酶水解后成青霉素酸，pH值下降到6.8以下，用酚红指示剂，由红(紫)色 (原液:枸橼酸缓冲液pH8.5) →黄色(pH6.8以下);淀粉-碘测定法:β内酰胺酶破坏β内酰胺环，碘与被打开β内酰胺环结合，使蓝色的淀粉-碘复合物转变成无色。β-内酰胺酶是多种不同类型以β-内酰胺类抗菌药物为底物的降解酶，通过水解β-内酰胺环造成β-内酰胺类药物失去活性，将待测菌与头孢硝噻吩作用一定时间后，如待测菌产生青霉素酶，则可水解头孢硝噻吩的β-内酰胺环，颜色由黄色变为红色。

　　内酰胺酶检测的临床意义：

　　1.细菌产生β-内酰胺酶可使易感抗生素水解而灭活。

　　2.对革兰阴性菌产生的β-内酰胺酶稳定的广谱青霉素和二、三代头孢菌素，其耐药机制不是由于抗生素被β-内酰胺酶水解，而是由于抗生素与大量的β-内酰胺酶结合，使其停留于胞膜外间隙中，不能进入靶位发生抗菌作用。

　　3.青霉素结合蛋白(PBPs)靶蛋白与抗生素亲和力降低，PBPs增多或产生新的PBPs均可使抗菌药物失去抗菌作用。

　　4.细菌的细胞壁或外膜的通透性改变，使抗生素不能或很少进入细菌体内到达作用靶位，革兰阴性菌的外膜是限制β-内酰胺类抗生素透入菌体的一道屏障。铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药性是由于外膜非特异性孔道蛋白缺陷所致的。