1.纸片扩散法

　　(1）初筛试验∶选用头孢泊肟、头孢他啶、氦曲南、头孢噻肟或头孢曲松(每片含量均为30ug)药敏纸片中的至少2种，用苗勒-欣顿(MHA)琼脂，标准纸片扩散法测试抑菌环直径，按美国临床实验室标准化委员会(NCC LS)1997年标准进行判断。凡头孢泊肟或头孢他啶的抑菌环直径≤22mm，头孢曲松s25mm，氨曲南或头孢噻肟≤27mm，均应高度怀疑为ESBLs菌株，应进一步作确认试验来加以确诊。

　　(2）表型确证试验∶用头孢他啶(每片30ug)和头孢他啶加克拉维酸(30ug和10ug);头孢噻肮(每片30ug)和头孢噻肟加克拉维酸(30ug和10ug);分别测量2种纸片单独及加克拉维酸的抑菌环直径。加克拉维酸和不加克拉维酸的抑菌环直径≥5mm可确认为ESBLs菌株。

　　⒉.微量肉汤稀释法

　　(1）初筛试验︰原理同ESBLs纸片扩散法步骤∶将大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌配成相应浊度的菌悬液，加入含有以下浓度药物的微量反应板中，头孢泊肟、头孢他啶、氦曲南、头孢噻肠、头孢曲松。然后将接种了待测菌的反应板置于35℃环境下，孵育16~18小时后观察细菌在不同药物中的生长现象。

　　(2）表型确证试验∶按照药敏试验的微量肉汤稀释法，将大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌配成相应浊度的菌悬液，加入含有以下梯度浓度药物的微量反应板中，头孢他啶的浓度范围为0.25~128ug/ml，头孢他啶/克拉维酸为0.25/4~128/4ug/ml，头孢噻肟为0.25~64ug/d，头孢噻污/克拉维酸为0.25/4~64/41ug/ml。置于35℃环境下，孵育16~18小时后观察在不同浓度药物中的生长现象。

　　以上就是内酰胺酶检测常用的两种方法，希望能帮助大家更好地进行检测并保证其检测的准确性。