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两种方法教您正确进行内酰胺酶检测!
发布时间:2021-03-02   点击次数:179次
       内酰胺酶检测的检测速度快,所以检测β-内酰胺酶与常规药敏实验相比,能更快地获得结果。为了保证内酰胺酶检测的准确性,操作人员需要按照正确的方法来进行检测,下面我们就来介绍一下常用的两种方法。
  1.纸片扩散法
  (1)初筛试验∶选用头孢泊肟、头孢他啶、氦曲南、头孢噻肟或头孢曲松(每片含量均为30ug)药敏纸片中的至少2种,用苗勒-欣顿(MHA)琼脂,标准纸片扩散法测试抑菌环直径,按美国临床实验室标准化委员会(NCC LS)1997年标准进行判断。凡头孢泊肟或头孢他啶的抑菌环直径≤22mm,头孢曲松s25mm,氨曲南或头孢噻肟≤27mm,均应高度怀疑为ESBLs菌株,应进一步作确认试验来加以确诊。
  (2)表型确证试验∶用头孢他啶(每片30ug)和头孢他啶加克拉维酸(30ug和10ug);头孢噻肮(每片30ug)和头孢噻肟加克拉维酸(30ug和10ug);分别测量2种纸片单独及加克拉维酸的抑菌环直径。加克拉维酸和不加克拉维酸的抑菌环直径≥5mm可确认为ESBLs菌株。
  ⒉.微量肉汤稀释法
  (1)初筛试验︰原理同ESBLs纸片扩散法步骤∶将大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌配成相应浊度的菌悬液,加入含有以下浓度药物的微量反应板中,头孢泊肟、头孢他啶、氦曲南、头孢噻肠、头孢曲松。然后将接种了待测菌的反应板置于35℃环境下,孵育16~18小时后观察细菌在不同药物中的生长现象。
  (2)表型确证试验∶按照药敏试验的微量肉汤稀释法,将大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌配成相应浊度的菌悬液,加入含有以下梯度浓度药物的微量反应板中,头孢他啶的浓度范围为0.25~128ug/ml,头孢他啶/克拉维酸为0.25/4~128/4ug/ml,头孢噻肟为0.25~64ug/d,头孢噻污/克拉维酸为0.25/4~64/41ug/ml。置于35℃环境下,孵育16~18小时后观察在不同浓度药物中的生长现象。
  以上就是内酰胺酶检测常用的两种方法,希望能帮助大家更好地进行检测并保证其检测的准确性。

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