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抑菌圈的大小可判定待测药物抑菌效价
发布时间:2022-09-20   点击次数:49次
  抑菌圈主要与药敏试验有关,是利用待测药物在琼脂平板中扩散使其周围的细菌生长受到抑制而形成透明圈,即抑菌圈。通过抑菌圈大小可以判定待测药物抑菌效价。那么怎样才能出现明显的抑菌圈呢,下面我们来具体说说。
 
  产生抑菌圈的方法主要有纸片扩散法(K-B法)、牛津杯法和打孔法三种。以教学中比较常做实验的K-B法为例,先了解一下哪些因素会影响试验结果,再针对性地解决,使得到明显的抑菌圈。
 
  1.药敏纸片:纸片选用直径6.00~6.35mm,吸水量为20ul的专用药敏纸片。纸片的选择会影响药物扩散和细菌生长。含药纸片一般密封贮存在2~8℃,不超过一周,所以使用前应当提前从冰箱取出平衡室温至少10min后再打开,避免因冷凝水影响药效,影响结果。
 
  2.菌液:配制菌液的前提是保证菌液的纯度,以免混入其他菌;另外浓度的配制一般是选择麦氏比浊法,调成0.5麦氏单位的标准菌液浓度。所以配制浓度时应当严格对照,浓度太高或太低对实验有影响。
 
  3.培养基:选择水解酪蛋白培养基(M-H),为兼性厌氧菌和需氧菌药敏试验标准培养基,一般4℃保存。
 
  以上的材料准备,如果是学校的实验课程,一般有的实验老师会直接帮忙准备好。
 
  4.细菌接种:用无菌棉拭子蘸取已校正浓度的菌液,在管壁挤掉多余菌液。涂布整个培养基表面,每次将平板旋转60°,涂抹三次,较后沿周边擦绕两圈,以保证菌液涂抹均匀。这样才能使使抑菌圈显现明显,试验结果不会出现较大的偏差。
 
  5.贴药敏片:涂菌后放置15min使平板上的水分被琼脂完全吸收后,才能贴药敏纸片。这个时间不能过长,否则会使细菌产生耐药。
 
  ①贴药敏纸片时,每取一种药敏纸片必须烧一下镊子口,避免药敏纸片之间相互混淆,以提高药敏的准确性。
 
  ②两纸片之间距离不小于24mm,纸片距平板边缘不小于15mm,以免得到的抑菌圈交叉或者不完整。
 
  ③纸片贴后不可再拿起,放下后轻压使药敏纸片贴合在平板上。可以在还未贴之前在培养基底部量好距离,确定好纸片放置位置。
 
  ④将平板翻转放置。
 
  6.恒温箱培养:35℃恒温箱培养18~24小时。放置的时候记得放置平稳。
 
  整个流程里面比较会影响实验结果的就差不多这些了,任何实验都存在不可控的误差,只有操作得当,结果才能更好。
 
  以上方法可以出现较明显的抑菌圈,希望能帮助大家更好地进行实验。

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